熒光顯微鏡是利用一個(gè)高發(fā)光效率的點(diǎn)光源，經(jīng)過(guò)濾色系統發(fā)出一定波長(cháng)的光(如紫外光3650入或紫藍光4200入)作為激發(fā)光、激發(fā)標本內的熒光物質(zhì)發(fā)射出各種不同顏色的熒光后，再通過(guò)物鏡和目鏡的放大進(jìn)行觀(guān)察。這樣在強烈的對襯背景下，即使熒光很微弱也易辨認，敏感性高，主要用于細胞結構和功能以及化學(xué)成分等的研究。
熒光顯微鏡的基本構造是由普通光學(xué)顯微鏡加上一些附件(如熒光光源、激發(fā)濾片、雙色束分離器和阻斷濾片等)的基礎上組成的。熒光光源——般采用超高壓汞燈(50一200W)，它可發(fā)出各種波長(cháng)的光，但每種熒光物質(zhì)都有一個(gè)產(chǎn)生*強熒光的激發(fā)光波長(cháng)，所以需加用激發(fā)濾片(一般有紫外、紫色、藍色和綠色激發(fā)濾片)，僅使一定波長(cháng)的激發(fā)光透過(guò)照射到標本上，而將其他光都吸收掉。每種物質(zhì)被激發(fā)光照射后，在極短時(shí)間內發(fā)射出較照射波長(cháng)更長(cháng)的可見(jiàn)熒光。熒光具有專(zhuān)一性，一般都比激發(fā)光弱，為能觀(guān)察到專(zhuān)一的熒光，在物鏡后面需加阻斷(或壓制)濾光片。
熒光顯微鏡使用注意事項：
1、嚴格按照說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行操作，不要隨意改變程序。
2、應在暗室中進(jìn)行檢查。進(jìn)入暗室后，接上電源，點(diǎn)燃超高壓汞燈5～15min，待光源發(fā)出強光穩定后，眼睛*適應暗室，再開(kāi)始觀(guān)察標本。
3、防止紫外線(xiàn)對眼睛的損害，在調整光源時(shí)應戴上防護眼鏡。
4、檢查時(shí)間每次以1～2h為宜，超過(guò)90min，超高壓汞燈發(fā)光強度逐漸下降，熒光減弱;標本受紫外線(xiàn)照射3～5min后，熒光也明顯減弱;所以，Z多不得超過(guò)2～3h。
5、光源壽命有限，標本應集中檢查，以節省時(shí)間，保護光源。天熱時(shí)，應加電扇散熱降溫，新?lián)Q燈泡應從開(kāi)始就記錄使用時(shí)間。燈熄滅后欲再用時(shí)，須待燈泡充分冷卻后才能點(diǎn)燃。一天中應避免數次點(diǎn)燃光源。
6、標本染色后立即觀(guān)察，因時(shí)間久了熒光會(huì )逐漸減弱。若將標本放在聚乙烯塑料袋中保存，可延緩熒光減弱時(shí)間，防止封裱劑蒸發(fā)。
7、熒光亮度的判斷標準：一般分為四級，即“-”表示無(wú)或可見(jiàn)微弱熒光。“+”表示僅能見(jiàn)明確可見(jiàn)的熒光。“++”表示可見(jiàn)有明亮的熒光。“+++”表示可見(jiàn)耀眼的熒光。
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更新時(shí)間：2022-04-24 
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