PCR基因擴增儀是自動(dòng)化和智能化的儀器設備
更新時(shí)間:2015-11-20
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PCR基因擴增儀的設計均按照DNA變性、復性和延伸三個(gè)環(huán)節以及溫度均恒、傳導快和升降溫迅速等原則,結合傳感技術(shù)、微電子技術(shù)和電子計算機等技術(shù)發(fā)展而成的自動(dòng)化和智能化的儀器設備
PCR基因擴增儀是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內InVitro的大量合成,它是利用DNA聚合酶進(jìn)行專(zhuān)一性的連鎖復制。目前常用的技術(shù),可以將一段基因復制為原來(lái)的一百億至一千億倍。根據DNA擴增的目的和檢測的標準,可以將PCR儀分為普通PCR儀,梯度PCR儀,原位PCR儀,實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀四類(lèi)。
PCR基因擴增儀技術(shù)原理
該技術(shù)是在模板DNA、引物和四種脫氧核糖核苷酸存在下,依賴(lài)于DNA聚合酶的酶促合成反應。DNA聚合酶以單鏈DNA為模板,借助一小段雙鏈DNA來(lái)啟動(dòng)合成,通過(guò)一個(gè)或兩個(gè)人工合成的寡核苷酸引物與單鏈DNA模板中的一段互補序列結合,形成部分雙鏈。在適宜的溫度和環(huán)境下,DNA聚合酶將脫氧單核苷酸加到引物3´-OH末端,并以此為起始點(diǎn),沿模板5´→3´方向延伸,合成一條新的DNA互補鏈。
PCR基因擴增儀反應步驟
分別是1.變性,2.引物退火,3.引物延伸。所謂變性是將DNA加熱至90-95℃變性,將雙鏈DNA加熱后轉為單鏈DNA做為復制的模板.而引物退火則是引物于一定的溫度下(冷卻至55-60℃)附著(zhù)于模板DNA兩端。zui后在DNA聚合酶的作用下(加熱至70-75℃)進(jìn)行引物的延伸及另一鏈的合成。